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本试剂盒适用于从血浆、血清、肺泡灌洗液等无细胞体液中纯化和富集病毒、细菌和真菌等病原微生物DNA及RNA。用本试剂盒纯化的微生物DNA及RNA适用于多种下游应用，包括全基因组测序分析、基于16SrDNA的高灵敏度微生物组分析，以及宏基因组鸟枪法测序分析。

• 使用前请检查Buffer LBS-A是否出现沉淀，如有沉淀出现，请置于56℃水浴重新溶解。本试剂盒旨在从完整的微生物细胞中分离DNA及RNA，为了保证微生物DNA及
  
• RNA的最佳回收效率，样品应保证新鲜。如果需要储存或运输，最好在2～8℃条件下进行，不可冻融，冻融会损坏微生物细胞的完整性。
  
• 为避免由于污染造成的错误结果，请保持工作区域清洁和穿防护服，并合理设置对照品进行质控。采用适当措施处理样品材料，降低交叉污染的风险。提取过程中，使用DNA/RNA-free的移液器吸头和消耗品，试剂使用完后立即盖好瓶盖，防止污染。

• 样本前处理：
  
  • 尿液、胸腹水、脑脊液等非粘稠体液样本：直接取400μL样本，进行第2步操作。
    
  • 拭子类样本(如鼻、咽及肛拭子等)：涡旋振荡混匀后，直接取400μL进行第2步实验。
    
  • 痰液、肺泡灌洗液样本：取适量液化痰液样本至1.5mL离心管中(液化方法推荐使用1.5倍体积的Buffer GB1，本试剂盒不提供)，12000rpm离心5min，弃上清，使用400μL PBS重悬沉淀后提取。对于含有少量粘稠痰液的肺泡灌洗液，将尽量多的肺泡灌洗液样本先进行离心，小心去除上清，留取下层粘稠部分(含痰液、细胞、菌体)参照痰液样本进行液化处理。
    
  • 血液类样本：血清、血浆及少量全血样本(少于200μL)可直接取400μL(少量全血使用PBS补足)进行第2步实验，大体积全血样本推荐使用红细胞裂解液(货号：WE0218)处理后再进行提取。
• 向Lysis Tubes中加入400μL样本和400μL Buffer LBS-A，可用以下振荡方式处理：
  
  • 将Lysis Tubes置于室温涡旋振荡10min；
    
  • 将Lysis Tubes置于恒温混匀仪上以最大振速(2500～2900rpm)处理10min；
    
  • 将Lysis Tube置于样本均质仪中，可根据不同品牌的仪器选择合适的程序进行裂解：如使用MP公司FastPrep-24～5G(6M/S的速度振荡30sec，间隔30sec，共6个循环)。
• 室温12000rpm离心1min，转移600μL上清至新的离心管中，加20μL Proteinase K(若经过去宿主处理，则此步不需再加Proteinase K)，涡旋震荡混匀5s后，置于65℃ 600rpm孵育10min。
  
• 瞬离离心管，确保管壁无液体残留后，在离心管中加入20μL Magbeads PN和300μL异丙醇，涡旋5 s后，室温，1500rpm孵育5min。
  
  • Magbeads PN使用前，涡旋以保证充分重悬。
• 瞬离离心管，确保管壁无液体残留后，将离心管置于磁力架上静置2min或至磁珠完全吸附，用移液器小心吸弃所有上清。
  
• 在离心管中，加入500μL Buffer WB1，室温，1500rpm孵育3min，将离心管置于磁力架上静置2min或至磁珠完全吸附，用移液器小心吸弃所有上清。
  
• 重复步骤6一次。
  
• 在离心管中，加入500μL Buffer WB2，室温，1500rpm孵育3min，将离心管置于磁力架上静置2min或至磁珠完全吸附，用移液器小心吸弃所有上清。
  
• 重复步骤8一次。
  
• 离心管放置于磁力架上，敞盖晾干5min。
  
• 在离心管中加入70μL RNase-Free Water，用移液器吹打混匀，置于56℃ 600rpm孵育5min。瞬离离心管后，将离心管置于磁力架上静置2min或至磁珠完全吸附，用移液器转移所有上清至新离心管中。获得的核酸溶液置于-20℃长期保存。